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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒酶免疫技術
點擊次數:1712 更新時間:2018-05-17

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒酶免疫技術是利用酶催化底物反應的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種標記免疫技術。該技術所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專一性強、性質穩定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質穩定,繼續保留著它的活性部分和催化能力。

酶和酶作用的底物

     1.辣根過氧化酶(HRP):HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,純化方法也不復雜。它是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD;是一種復合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結合而成的一種卟啉蛋白質。

     2.堿性磷酸酶(AP):ELISA試劑盒是從牛腸粘膜或大腸桿菌中提取。從大腸桿菌提取的AP分子量為80kD,酶作用的zui適pH為8.0;用小牛腸黏膜提取的AP分子量為l00kD,zui適pH為9.6.一般采用對**苯***(p-NPP)作為底物。它可制成片狀試劑,使用方便。在ELISA中應用AP系統,其敏感性一般高于應用HRP系統,空白值也較低。但由于AP較難得到高純度制劑,穩定性較HRP低,價格較HRP高,制備酶結合物時得率較HRP低等原因,國內在ELISA中一般均采用HRP.

3.其他的酶:有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶和脲酶等。β-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基傘基-β-半乳糖苷,經酶水解后產生熒光物質4-甲基傘酮,可用熒光計檢測。抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒熒光的放大作用大大提高了方法的敏感度。AP也可應用可產生熒光的傘基***作底物。其缺點是需要熒光計測定,而且如用固相載體直接作為測定容器,此載體不可發出熒光。

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

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